Resveratrol Alleviates Osteoporosis by Promoting Osteogenic Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells via SITR1/PI3K/AKT Pathway / El Resveratrol Alivia la Osteoporosis al Promover la Diferenciación Osteogénica de las Células Madre Mesenquimales de la Médula Ósea a Través de la Vía SITR1/PI3K/AKT

SUMMARY: Senile osteoporosis is mainly caused by reduced osteoblast differentiation and has become the leading cause of fractures in the elderly worldwide. Natural organics are emerging as a potential option for the prevention and treatment of osteoporosis. This study was designed to study the effect of resveratrol on osteogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in osteoporosis mice. A mouse model of osteoporosis was established by subcutaneous injection of dexamethasone and treated with resveratrol administered by gavage. In vivo and in vitro, we used western blot to detect protein expression, and evaluated osteogenic differentiation of BMSCs by detecting the expression of osteogenic differentiation related proteins, calcium deposition, ALP activity and osteocalcin content. Resveratrol treatment significantly increased the body weight of mice, the level of serum Ca2+, 25(OH)D and osteocalcin, ration of bone weight, bone volume/total volume, trabecular thickness, trabecular number, trabecular spacing and cortical thickness in osteoporosis mice. In BMSCs of osteoporosis mice, resveratrol treatment significantly increased the expression of Runx2, osterix (OSX) and osteocalcin (OCN) protein, the level of calcium deposition, ALP activity and osteocalcin content. In addition, resveratrol treatment also significantly increased the expression of SIRT1, p-PI3K / PI3K and p-AKT / AKT in BMSCs of osteoporosis mice. In vitro, resveratrol increased the expression of SIRT1, p-PI3K / PI3K and p-AKT / AKT, Runx2, OSX and OCN protein, the level of calcium deposition, ALP activity and osteocalcin content in BMSCs in a concentration-dependent manner, while SIRT1 knockdown significantly reversed the effect of resveratrol. Resveratrol can attenuate osteoporosis by promoting osteogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells, and the mechanism may be related to the regulation of SIRT1/PI3K/AKT pathway.

La osteoporosis senil es causada principalmente por una diferenciación reducida de osteoblastos y se ha convertido en la principal causa de fracturas en las personas mayores en todo el mundo. Los productos orgánicos naturales están surgiendo como una opción potencial para la prevención y el tratamiento de la osteoporosis. Este estudio fue diseñado para estudiar el efecto del resveratrol en la diferenciación osteogénica de las células madre mesenquimales de la médula ósea (BMSC) en ratones con osteoporosis. Se estableció un modelo de osteoporosis en ratones mediante inyección subcutánea de dexametasona y se trató con resveratrol administrado por sonda. In vivo e in vitro, utilizamos Western blot para detectar la expresión de proteínas y evaluamos la diferenciación osteogénica de BMSC detectando la expresión de proteínas relacionadas con la diferenciación osteogénica, la deposición de calcio, la actividad de ALP y el contenido de osteocalcina. El tratamiento con resveratrol aumentó significativamente el peso corporal de los ratones, el nivel sérico de Ca2+, 25(OH)D y osteocalcina, la proporción de peso óseo, el volumen óseo/ volumen total, el espesor trabecular, el número trabecular, el espaciado trabecular y el espesor cortical en ratones con osteoporosis. En BMSC de ratones con osteoporosis, el tratamiento con resveratrol aumentó significativamente la expresión de las proteínas Runx2, osterix (OSX) y osteocalcina (OCN), el nivel de deposición de calcio, la actividad de ALP y el contenido de osteocalcina. Además, el tratamiento con resveratrol también aumentó significativamente la expresión de SIRT1, p-PI3K/PI3K y p-AKT/AKT en BMSC de ratones con osteoporosis. In vitro, el resveratrol aumentó la expresión de las proteínas SIRT1, p-PI3K/PI3K y p- AKT/AKT, Runx2, OSX y OCN, el nivel de deposición de calcio, la actividad de ALP y el contenido de osteocalcina en BMSC de manera dependiente de la concentración, mientras que La caída de SIRT1 revirtió significativamente el efecto del resveratrol. El resveratrol puede atenuar la osteoporosis al promover la diferenciación osteogénica de las células madre mesenquimales de la médula ósea, y el mecanismo puede estar relacionado con la regulación de la vía SIRT1/PI3K/AKT.

Terapia celular en enfermedades neurodegenerativas: una opción de tratamiento innovadora / Cell Therapy in Neurodegenerative Diseases: An Innovative Treatment Option

Introducción. Las enfermedades neurodegenerativas se caracterizan por la degeneración y pérdida de células nerviosas que conllevan trastornos de disfunción cognitiva y sensoriomotora, enfermedades tales como la esclerosis múltiple (EM) y la enfermedad de Párkinson (EP) entre otras. Recientemente, se ha reportado sobre resultados prometedores de la terapia celular con Células Madre Mesenquimales, células con la capacidad de diferenciarse en células del tejido nervioso, en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas. Objetivo. Evidenciar la utilidad de las células madre mesenquimales de médula ósea en el tratamiento de la esclerosis múltiple y enfermedad de Párkinson, como una posibilidad terapéutica en los tratamientos convencionales no favorables. Material y métodos. Estudio longitudinal prospectivo que consideró pacientes con EM (n=2) y EP (n=2), quienes como tratamiento coadyuvante recibieron células madre mesenquimales de médula ósea mediante método de trasplante autólogo. Resultados. Los pacientes recibieron entre 1 a 3 sesiones de reinfusión de células madre mesenquimales, cuyos seguimientos y evaluaciones periódicas reflejaron respuestas beneficiosas. Se observó mejoras representativas en las respectivas puntuaciones EDSS y UPDRS, así como, en la calidad de vida de los pacientes. Conclusiones . La terapia celular con células madre mesenquimales de médula ósea constituye una posibilidad terapéutica factible para las enfermedades neurodegenerativas como la EM y EP.

Introduction. Neurodegenerative disorders are characterized by a degeneration and loss of nerve cells leading to cognitive and sensorimotor dysfunction disorders, such as multiple sclerosis (MS) and Parkinson's disease (PD) among others. Recently, it has been reported promising results of cell therapy employing Mesenchymal Stem Cells, cells with the ability to differentiate into nervous tissue cells, in the treatment of neurological diseases. Objective. To expose the utility of bone marrow mesenchymal stem cells in the treatment of multiple sclerosis and Parkinson's disease, as a therapeutic option in unfavorable treatment outcomes. Material and methods. Prospective longitudinal study that included MS (n=2) and PD (n=2) patients, who received autologous transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells as adjuvant treatment. Results. Patients received autologous MSC therapy from 1 to 3 reinfusions, follow-up and regular evaluations reflected beneficial responses. Representative improvements concerning patients' respectively EDSS or UPDRS scores, as well as in their quality of life were observed. Conclusions. Mesenchymal stem cells therapy constitutes a feasible therapeutic option for neurodegenerative disorders such as MS and PD.

Terapia celular en quemadura de segundo grado profundo: reporte de caso clínico / Cell therapy in deep second-degree burn wound: clinical case report

Se reporta el caso de un paciente pediátrico con quemaduras de segundo grado profundo en muslo derecho, con superficie corporal quemada del 8% por agua caliente, que recibió terapia celular como estrategia terapeútica alternativa. Tras procedimiento terapeútico con injertos de piel, se evidenció remanente una úlcera secundaria a quemadura (7 x 4 cm); por lo que, se procedió a valoración para terapia con células madres mesenquimales autólogas procedentes de médula ósea. Se realizó 8 sesiones de sembrado de células madre. La respuesta y evolución fueron favorables, la regeneración de tejidos se dio desde la profundidad hacia la superficie y desde el lateral a medial de la úlcera. Se evidenció revascularización y posterior epitelización de la zona afectada, sin secuelas de cicatrización.

Case report of a pediatric patient with deep second degree burn wounds on the right thigh, body surface area burnt 8% due to boiling water, who received cell therapy as an alternative therapeutic strategy. After a therapeutic procedure with skin grafts, a remaining burn wound (7 x 4 cm) was evidenced; consequently, an assessment for therapy using autologous mesenchymal stem cells derived from bone marrow was made. It was performed 8 sessions of somatic stem cells seeding. Results were favorable, tissue regeneration occurred from the depth to the surface, and from the lateral to medial side of the burn wound. Revascularization and subsequent epithelialization in the affected area were evidenced, without scarring repercussion.

Alcance de las células madre derivadas de tejido adiposo / Scope of stem cells derived from adipose tissue

Introducción: En el tejido adiposo se han identificado células madre mesenquimales con capacidad autorrenovadora y multipotencial. Mediante digestión enzimática y centrifugado del lipoaspirado se libera una población heterogénea de células denominada fracción vascular estromal, con innumerables potencialidades terapéuticas en el campo de la medicina regenerativa. Objetivo: Actualizar el alcance de las células madre derivadas de tejido adiposo en la terapia regenerativa. Método: Se revisaron 38 artículos entre los años 2000 y 2019 en las bases de datos Scielo, ScienceDirect, Medline y Pubmed. Desarrollo: Las células de la fracción vascular estromal se caracterizan por su capacidad de generar tejido adiposo y vasos sanguíneos, y por la producción de factores de crecimiento que ayudan en la supervivencia de los adipocitos y la formación de una red vascular. El principal mecanismo de acción de las células madre derivadas de tejido adiposo parece deberse a su acción paracrina y a la sinergia con células endoteliales. En el campo de la medicina regenerativa se han utilizado en el tratamiento de cicatrices patológicas y de fibrosis deformantes con impotencia funcional, en las reconstrucciones de secuelas por cáncer y en el cierre precoz de zonas cruentas. Conclusiones: La lipotransferencia es un procedimiento con un mínimo de complicaciones que constituye una de las opciones terapéuticas más empleadas para corregir defectos en los tejidos, debido a que no solo es un medio de relleno, sino que también permite la regeneración y restauración tisular. La presencia de células madre en el tejido adiposo, unido a su accesibilidad, disponibilidad e histocompatibilidad, ha motivado su aplicación cada vez más expandida en la medicina estética, reconstructiva y regenerativa(AU)

Introduction: Mesenchymal stem cells with self-renewing and multipotential capacity have been identified in adipose tissue. By means of enzymatic digestion and centrifugation of the lipoaspirate a heterogeneous population of cells called vascular stromal fraction is released. It has innumerable therapeutic potentialities in the field of regenerative medicine. Objective: To update the scope of stem cells derived from adipose tissue in regenerative therapy. Method: 38 articles published between 2000 and 2019 in the Scielo, ScienceDirect, Medline and Pubmed databases were reviewed. Development: The cells of the vascular stromal fraction are characterized by generating adipose tissue and blood vessels and by the production of growth factors that help in the survival of adipocytes and the formation of a vascular network. The main mechanism of action of stem cells derived from adipose tissue appears to be due to their paracrine action and synergy with endothelial cells. Stem cells derived from adipose tissue have been used in regenerative medicine for the treatment of pathological scars and deforming fibrosis with functional impotence, in the reconstruction of cancer sequelae and in the early closure of bloody areas. Conclusions: Lipotransfer is a procedure with a minimum of complications that constitutes one of the most widely used therapeutic options to correct tissue defects, since it is not only a filling medium, but also allows tissue regeneration and restoration. The presence of stem cells in adipose tissue, together with their accessibility, availability and histocompatibility, has motivated their increasingly widespread application in aesthetic, reconstructive and regenerative medicine(AU)

Equine yolk sac: a stem cells source / Saco vitelino equino: una fuente de células madre

SUMMARY: Mesenchymal stem cells are characterized by in vitro high proliferation and multilineage potential maintenance. This study aimed to isolate and characterize equine YS mesenchymal stem cells and compare these with amniotic membranes. The yolk sac (YS) and amniotic membranes (AM) were obtained from 20 pregnant mares with gestational age around 30 days. Cells were cultured in α-MEM supplemented with 15 % FBS, 1 % antibiotic solution, 1 % L-glutamine and 1 % nonessential amino acids. To cell characterization we used cytogenetic analysis, fibroblast colony-forming unit assays, cell growth curves, immunophenotyping, flow cytometry, differentiation assays and teratoma formation. Results: Both cell sources presented fibroblastoid and epithelioid-like format. The YS cells have lower colony formation potential then AM ones, 3 versus 8 colonies per 103 plated cells. However, YS cells grew progressively while AM cells showed steady. Both, the YS and amnion cells immunolabeled for Oct-4, Nanog, SSEA-3, cytokeratin 18, PCNA, and vimentin. In addition, presented mesenchymal, hematopoietic, endothelial and pluripotency markers in flow cytometry. Discussion: Both cell sources presented high plasticity and differed into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic lineages, and no tumor formation in nude mice was observed. The results suggest that horse YS may be useful for cell therapy such as amnion-derived cells.

RESUMEN: Las células madre mesenquimales se caracterizan por una alta proliferación in vitro y un mantenimiento potencial de múltiples líneas. Este estudio tuvo como objetivo aislar y caracterizar las células madre mesenquimales del saco vitelino equinas y compararlas con las membranas amnióticas. Se obtuvo el saco vitelino (SV) y las membranas amnióticas (MA) de 20 yeguas preñadas con edad gestacional de aproximadamente 30 días. Las células se cultivaron en α -MEM suplementado con 15 % de FBS, 1 % de solución antibiótica, 1 % de L-glutamina y 1 % de aminoácidos no esenciales. Para la caracterización celular utilizamos análisis citogenéticos, ensayos de unidades de colonias de fibroblastos, curvas de crecimiento celular, inmunofenotipaje, citometría de flujo, ensayos de diferenciación y formación de teratomas. Ambas fuentes celulares presentaron formato fibroblastoideo y epitelioide. Las células SV tienen un potencial de formación de colonias más bajo que las de MA, 3 versus 8 colonias por 103 células en placa. Sin embargo, las células SV crecieron progresivamente mientras que las células MA se mostraron estables. Tanto las células YS como las células amnios están inmunomarcadas para Oct-4, Nanog, SSEA-3, citoqueratina 18, PCNA y vimentina. Además, presentó marcadores mesenquimales, hematopoyéticos, endoteliales y pluripotenciales en citometría de flujo. Ambas fuentes celulares presentaron alta plasticidad y diferían en linajes osteogénicos, adipogénicos y condrogénicos, y no se observó formación de tumores en ratones. Los resultados sugieren que el SV de caballo puede ser útil para la terapia celular, como las células derivadas de amnios.

Human olfactory mesenchymal stromal cells co-expressing horizontal basal and ensheathing cell proteins in culture / Las células mesenquimales del estroma olfatorio humano coexpresan proteínas de las células basales horizontales y de recubrimiento neural en cultivo

Introduction: The olfactory neuro-epithelium has an intrinsic capability of renewal during lifetime provided by the existence of globose and horizontal olfactory precursor cells. Additionally, mesenchymal stromal olfactory cells also support the homeostasis of the olfactory mucosa cell population. Under in vitro culture conditions with Dulbecco modified eagle/F12 medium supplemented with 10% fetal bovine serum, tissue biopsies from upper turbinate have generated an adherent population of cells expressing mainly mesenchymal stromal phenotypic markers. A closer examination of these cells has also found co-expression of olfactory precursors and ensheathing cell phenotypic markers. These results were suggestive of a unique property of olfactory mesenchymal stromal cells as potentially olfactory progenitor cells. Objective: To study whether the expression of these proteins in mesenchymal stromal cells is modulated upon neuronal differentiation. Materials and methods: We observed the phenotype of olfactory stromal cells under DMEM/F12 plus 10% fetal bovine serum in comparison to cells from spheres induced by serum-free medium plus growth factors inducers of neural progenitors. Results: The expression of mesenchymal stromal (CD29+, CD73+, CD90+, CD45-), horizontal basal (ICAM-1/CD54+, p63+, p75NGFr+), and ensheathing progenitor cell (nestin+, GFAP+) proteins was determined in the cultured population by flow cytometry. The determination of Oct 3/4, Sox-2, and Mash-1 transcription factors, as well as the neurotrophins BDNF, NT3, and NT4 by RT-PCR in cells, was indicative of functional heterogeneity of the olfactory mucosa tissue sample. Conclusions: Mesenchymal and olfactory precursor proteins were downregulated by serum-free medium and promoted differentiation of mesenchymal stromal cells into neurons and astroglial cells.

Introducción. El recambio celular del neuroepitelio olfatorio ocurre durante la vida del individuo gracias a precursores olfatorios. Además, las células mesenquimales del estroma también contribuyen a la homeostasis de la mucosa. Cuando un explante de una biopsia de mucosa se cultiva en un medio esencial mínimo, se genera una población predominante de células adherentes que expresan proteínas típicas de las células mesenquimales del estroma. La coexpresión de marcadores fenotípicos de precursores olfatorios y de células del recubrimiento del nervio olfatorio constituiría una propiedad única de las células mesenquimales del estroma. Objetivo. Determinar si la diferenciación celular de las células mesenquimales hacia fenotipos neurales modula la expresión de los marcadores mesenquimales característicos. Materiales y métodos. Se compararon las células aisladas de la mucosa olfatoria en un medio de cultivo con suplemento de 10 % de suero fetal bovino con esferas generadas en un medio sin suero más factores de crecimiento. Resultados. Se determinó la expresión de proteínas de las células mesenquimales del estroma (CD29+, CD73+, CD90+, CD45-), de las basales horizontales (ICAM-1/CD54+, p63+, p75NGFr+), y de las del recubrimiento del nervio olfatorio (nestin+, GFAP+) en la misma población cultivada. La determinación de Oct 3/4, Sox-2 y Mash-1, así como de las neurotrofinas BDNF, NT3 y NT4, sugirió que las células del estroma son funcionales. La expresión de las proteínas de las células mesenquimales y los precursores olfatorios, disminuyó en las células de las mesenesferas inducidas por ausencia de suero en el medio de cultivo. Conclusión. Las células mesenquimales del estroma de la mucosa olfatoria presentan una tendencia dominante hacia la diferenciación neural.

Capacidad multipotencial en células madre mesenquimales derivadas de la placenta humana en Panamá / Multipotent capacity of human placenta­derived mesenchymal stem cells in Panama

Introducción: Las células madre mesenquimales (MSCs) tienen la capacidad única de auto­renovación y pluripotencia con la cual apoyan en la regeneración de tejidos en or­ ganismos vivos. El mayor potencial terapéutico de las MSCs derivadas de la placenta (PDMSCs) humana, como fuente más joven de MSCs, estimula la búsqueda de las me­ jores condiciones de cultivo que preserven su capacidad de proliferar y diferenciarse. Sin embargo, estudios relacionados a la caracterización de la multipotencialidad de las PDMSCs durante periodos prolongados de cultivo, no han sido reportados en Panamá. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue el de implementar un proceso de aislamiento y cultivo que preserve las propiedades multipotentes en PDMSCs. Materiales y Méto­ dos: Placentas humanas a término completo fueron obtenidas para el aislamiento de las MSCs. Las PDMSCs fueron caracterizadas según su morfología, expresión positiva de marcadores CD90, CD73, CD105, y capacidad de proliferación y diferenciación a linajes mesodérmicos. Resultados: Se ha demostrado la obtención de poblaciones de PDMSCs con morfología fibroblástica, adherencia plástica, expresión positiva de los marcadores CD90, CD73 y CD105, y capacidad de diferenciación osteogénica, adi­ pogénica y condrogénica. Posterior al aislamiento y crio­preservación, las PDMSCs mantuvieron una viabilidad mayor de 95%, una tasa de proliferación por más de 40 días en cultivo, y la expresión positiva de los marcadores CD90, CD73, y CD105 al pasaje 16. Conclusión: Nuestros resultados demuestran una metodología eficiente para obten­ ción y cultivo de PDMSCs que mantienen sus características multipotentes durante períodos prolongados de cultivo, abriendo el camino para futuras terapias celulares

ntroduction: Human mesenchymal stem cells are (MSCs) unique in their pluripotency and their ability to self­renew in order to support tissue regeneration in living organisms. The increased therapeutic potential of PDMSCs as a pool of younger MSCs with a vast capacity for expansion, minor predisposition for tumor formation or immune reactions spurs the search for the best culture conditions to preserve their ability to differentiate and proliferate. However, studies regarding characterization of multipotent isolated PDMSCs during prolonged periods of culture has not been reported thus far in Panama. Therefore, in this study we seek to implement isolation and culture procedures that pre­ serve multipotent characteristics in PDMSCs. Materials and Methods: Full­term human placentas were obtained for the isolation of MSCs. PDMSCs where characterized based on their morphology, positive expression of CD90, CD73, and CD105, and their ability to proliferate and differentiate to mesodermal lineages. Results: It was demonstrated that our isolated PDMSCs presented the MSC characteristics of fibroblastic morphology, plastic adherence, positive expression of CD90, CD73, and CD105 markers, as well as osteogenesis, adipogenesis, and osteogenic differentiation ability. When PDMSCs were cultured after isolation or cryopreservation, viability was maintained above 95%, with their proliferation rate maintained after 40 days, and positive expression of CD90, CD73, and CD105 markers kept after 16 passages. Conclusion: Taken together, our results de­ monstrated a methodology to obtain successful source of isolated human PDMSCs that kept their multipotent properties over time, opening the path for future cellular therapies.

Aplicaciones de terapias de reemplazo celular al tratamiento de enfermedades poliglutamínicas / Applications of cell replacement therapies to the treatment of poly-glutamine diseases

Se realizó una revisión de la literatura especializada con el objetivo de evaluar el estado del arte en cuanto a la aplicación de terapias de reemplazo celular en enfermedades poliglutamínicas. Se consultaron las bases de datos HighWire y PubMed, con el uso de descriptores y operadores booleanos. Se recuperaron 84 artículos sobre la temática, publicados en revistas con un factor de impacto promedio de 5,42. Se discuten los estudios experimentales y pre-clínicos realizados con relación a terapias de reemplazo celular en enfermedades poliglutamínicas. Se demuestra la efectividad del uso de células madre de distintas fuentes en el mejoramiento de la función motora en modelos experimentales de enfermedades poliglutamínicas. Se revela la necesidad de realizar estudios multicéntricos a mediano y largo plazos, para la evaluación de los efectos terapéuticos de las terapias de reemplazo celular en enfermedades poliglutamínicas.

A review of the specialized literature was carried out with the aim of evaluating the state of the art regarding the application of cell replacement therapies in polyglutamine diseases. The HighWire and PubMed databases were consulted, with the use of Boolean descriptors and operators. 84 articles were retrieved on the subject, published in journals with an average impact factor of 5.42. The experimental and pre-clinical studies carried out in relation to cell replacement therapies in polyglutamine diseases are discussed. The effectiveness of the use of stem cells from different sources in the improvement of motor function in experimental models of polyglutamine diseases is demonstrated. The need to perform multicenter studies in the medium and long term is revealed, for the evaluation of the therapeutic effects of cell replacement therapies in polyglutamine diseases.

Expansion and phenotypic changes of mouse bone marrow mesenchymal cells cultured with FGF-2 and facial nerve-conditioned medium / Expansión y cambios fenotípicos de células mesenquimales de médula ósea de ratón cultivadas con FGF-2 y medio condicionado por el nervio facial

Mesenchymal cells (MCs) exhibit great regenerative potential due to their intrinsic properties and ability to restore tissue function, either directly through transdifferentiation or indirectly through paracrine effects. This study aimed to evaluate morphometric and phenotypic changes in MCs grown with facial nerve-conditioned medium in the presence or absence of fibroblast growth factor 2 (FGF-2). For quantitative phenotypic analysis, the expression of GFAP, OX-42, MAP-2, β-tubulin III, NeuN, and NF-200 was analyzed by immunocytochemistry. Cells cultured with facial nerve-conditioned medium in the presence of FGF-2 expressed GFAP, OX-42, MAP-2, β-tubulin III, NeuN, and NF-200. On average, the area and perimeter of GFAP-positive cells were higher in the group cultured with facial nerve-conditioned medium compared to the group cultured with conditioned medium and FGF-2 (p=0.0001). This study demonstrated the plasticity of MCs for neuronal and glial lineages and opens up new research perspectives in cell therapy and trans.differentiation.

Las células mesenquimales (CM) exhiben un gran potencial regenerativo debido a sus propiedades intrínsecas y la capacidad de restaurar la función del tejido, ya sea directamente, a través de la transdiferenciación, o indirectamente, a través de efectos parácrinos. Este estudio tuvo como objetivo evaluar los cambios morfométricos y fenotípicos en CM cultivadas con medio condicionado por nervio facial en presencia o ausencia de factor de crecimiento de fibroblastos 2 (FGF-2). Para el análisis fenotípico cuantitativo, se analizó la expresión de GFAP, OX-42, MAP-2, β-tubulina III, NeuN y NF-200 mediante inmunocitoquímica. Las células cultivadas con medio condicionado por el nervio facial en presencia de FGF-2 expresaban GFAP, OX-42, MAP-2, β-tubulina III, NeuN y NF-200. En promedio, el área y el perímetro de las células positivas para GFAP fueron mayores en el grupo cultivado con medio condicionado por el nervio facial en comparación con el grupo cultivado con medio acondicionado y FGF-2 (p = 0,0001). Este estudio demostró la plasticidad de CM para linajes neuronales y gliales y abre nuevas perspectivas de investigación en terapia celular y transdiferenciación.

Adult stem cells in the healing of fractures and bone grafts / Células-madre adultas en la cicatrización de fracturas e injertos óseos

ABSTRACT The traumatic accidents which result in fractures and even in impairment of a bone segment have a high prevalence in routine veterinary surgery. Many times these fractures are complex and difficulty healing or need bone grafts to preserve and restore the length of the affected limb. Thus, the recovery time of these animals is usually delicate and long, with complications risks, such as delayed union and non-union of the fractured bone segments or absence of graft incorporation. In this sense, the stem cells (SC) have shown to be a strong ally of the orthopedic doctors due to their capacity to provide osteoprogenitor cells, to increase the osteoinductive effect minimize the healing time and provide a greater efficiency to the repairing process. Due to that, before the expectation of their assignments, this review aims to describe the stem cells characteristics, their current applications in the fractures healing and, especially, their contribution to the bone grafts consolidation.

RESUMEN Los accidentes traumáticos que resultan en fracturas y hasta en el comprometimiento de un segmento óseo tienen alta prevalencia en la rutina quirúrgica veterinaria. Muchas veces esas fracturas son complejas y presentan dificultades de cicatrización o necesitan de injertos óseos para preservar y restaurar el largo del miembro acometido. De esa forma, el tiempo de recuperación de esos animales suele ser delicado y prolongado con riegos de complicaciones, como unión retardada y no unión de los segmentos óseos fracturados o ausencia de incorporación de los injertos. En este sentido, las células-madre (CT) vienen demostrando ser una fuerte aliada de los ortopedistas debido a su capacidad en proveer células osteoprogenitoras, de incrementar el efecto osteoinductor, minimizar el tiempo de cicatrización y proporcionar mayor eficiencia al proceso reparador. Frente a la expectativa de sus atribuciones, la presente revisión tiene por objetivo describir las características de las células-madre, sus aplicaciones actuales en la cicatrización de fracturas y, especialmente, su contribución en la consolidación de injertos óseos.

Cultivo de Células Madre Mesenquimales Sobre Hidrogeles Compuestos de Nanopartículas de Hidroxiapatita y Quitosano Foto-Entrecruzable / Mesenchymal Stem Cell Culture on Composite Hydrogels of Hydroxyapatite Nanoparticles and Photo-Crosslinking Chitosan

RESUMEN El quitosano (QT) es un biopolímero que ha sido ampliamente utilizado en aplicaciones de ingeniería de tejido óseo, demostrando un gran potencial para este propósito. El presente estudio tiene como objetivo desarrollar un sistema de hidrogel entrecruzable in situ, compuesto de quitosano y nano-partículas de hidroxiapatita (HAP), un equivalente al componente mineral del hueso. El quitosano fue modificado, utilizando reacciones de carbodiimida, con ácido lactobiónico y ácido azidobenzoico para hacerlo soluble a pH fisiológico y foto-entrecruzable, respectivamente. El quitosano modificado fue mezclado en diferentes proporciones con HAP, y luego de una corta exposición a luz UV, se formaron hidrogeles. Células madre mesenquimales de médula ósea de rata (MSC) fueron sembradas sobre estos hidrogeles y cultivadas por 4, 10 y 16 días, bajo condiciones osteogénicas y no-osteogénicas. A través de ensayos de proliferación celular, actividad de fosfatasa alcalina, y microscopía confocal, se observó que la mayoría de las formulaciones soportan la adhesión y proliferación celular, mostrando importantes interacciones célula-biomaterial, y una diferenciación osteogénica temprana destacada en las formulaciones 70:30 y 50:50, QT:HAP. Algunas formulaciones del sistema foto-entrecruzable tienen potencial en aplicaciones de ingeniería de tejido óseo, y se propone estudios más detallados de diferenciación celular.

ABSTRACT Chitosan (QT) is a biopolymer that has been used in widely used in bone tissue engineering applications, demonstrating great potential for that purpose. Therefore, the present study aims to develop an in situ crosslinking hydrogel system, composed of chitosan and hydroxyapatite (HAP). Briefly, chitosan was modified, using carbodiimide chemistry, with lactobionic and azidobenzoic acid to make it soluble at physiological pH and photo-crosslinkable, respectively. The modified chitosan was mixed with HAP, in different proportions, and later exposed to UV light, yielding hydrogels. Mesenchymal stem cells, from rat bone marrow, were seeded onto the hydrogels and cultured for 4, 10 and 16 days, under osteogenic and non-osteogenic conditions. Through cell proliferation and alkaline phosphatase activity assays, and confocal microscopy, it was observed that the majority of formulations supported cell adhesion and proliferation, and a significant early osteogenic differentiation in formulations 70:30 and 50:50, QT:HAP. According to these results, the proposed photo-crosslinking system has potential for tissue engineering applications, and further specific studies are proposed for cell differentiation.

Inductive role of sustentacular cells (Sertoli cells) conditioned medium on bone marrow derived mesenchymal stem cells / Papel inductivo del medio acondicionado de células sustentaculares (células de Sertoli) en las células madre mesenquimales derivadas de la médula ósea

RESUMEN: Las células madre de la línea germinal masculina son factores clave para la espermatogénesis masculina y la fertilidad. Las células sustentaculares (células de Sertoli) como células somáticas juegan un papel fundamental en la creación de un microambiente esencial para la auto-renovación y diferenciación de las células de la línea germinal masculina. Las células madre mesenquimales son reconocidas como células auto-renovables y multipotentes capaces de diferenciarse en múltiples tipos de células. La generación de células germinales masculinas a partir de células madre mesenquimales puede proporcionar un método terapéutico para tratar la infertilidad masculina. En este estudio, las células mesenquimales derivadas de la médula ósea (BMMSCs) se recuperaron de la médula ósea de ratones de 6-8 semanas de edad del Instituto de Investigación Médico Naval (NMRI). En el estudio se aislaron las células sustentaculares y se enrriquecieron usando placas revestidas con lectina. Se obtuvo el medio de condición celular después de diferentes intervalos de tiempo. Posteriormente se cultivaron las BMMSC con diferentes concentraciones de SCCM y medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) en diversos momentos. Se evaluaron marcadores específicos de células de línea germinal usando la reacción en cadena de polimerasa transcriptasa inversa (RT-PCR) e inmunocitoquímica. Los resultados mostraron que las BMMSCs cultivadas con SCCM durante 48h exhibieron transcritos específicos de línea germinal (Mvh, Iid4, piwil2) (p <0,05) y marcadores (Mvh, Scp3). Nuestros resultados indican que el cultivo de BMMSCs con SCCM puede conducir a la diferenciación efectiva de BMMSCs en células germinales y proporcionar una estrategia de tratamiento para la infertilidad masculina.

SUMMARY: Male germ line stem cells are key factors for male spermatogenesis and fertility. Sustentacular cells (Sertoli cells) as somatic cells play a pivotal role in creating essential microenvironment for the self-renewal and differentiation of the male germ line cells. Mesenchymal stem cells are recognized as self-renewing and multipotent cells able to differentiate into multiple cell types. The generation of male germ cells from mesenchymal stem cells may provide a therapeutic method to treat male infertility. In this study, Bone marrow derived mesenchymal cells (BMMSCs) were retrieved from the bone marrow of 6-8-week old Naval Medical Research Institute (NMRI) mice. Sustentacular cells (Sertoli cells) were isolated and made rich using lectin coated plates. Sustentacular cell condition medium (SCCM) was collected after different time intervals. Then the BMMSCs were cultured with different concentration of SCCM and Dulbecco's Modified Eagle's medium (DMEM) at various times. Specific markers of Germ line cells were evaluated by using Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunocytochemistry. The results showed that BMMSCs cultured with SCCM for 48h exhibited germ line specific transcripts (Mvh, Iid4, piwil2) (p< 0.05) and markers (Mvh, Scp3). Our findings represent that culturing BMMSCs with SCCM may lead to effective differentiation of BMMSCs into germline cells and provide a treatment strategy for male infertility.

EVALUACIÓN COMPORTAMENTAL DEL TRASPLANTE DE hMSC-GFP+ EN UN MODELO EXPERIMENTAL DE HEMIPARKINSON EN RATA WISTAR / Behavioral Evaluation of hMSC-GFP+ Transplantation in an Hemiparkinson Experimental Model in Wistar Rat

RESUMEN Se evaluó el efecto del trasplante de hMSC-GFP+ en un modelo experimental de Enfermedad de Parkinson (EP) en 27 ratas Wistar con tres grupos experimentales: control: animales sin cirugía, (CON n=7), lesionado: animales lesionados intracerebralmente con 6-OHDA a nivel de SNpc (LES n = 10) y trasplantado: animales LES con trasplante de hMSC-GFP+ intraestriatalmente (LES-T n = 10). Con el fin de evaluar la influencia del trasplante en el comportamiento motor, un mes después de la lesión, se desarrolló una batería comportamental compuesta por Test Neurológico (compuesto también por Pole Test y Test de Barra transversal, además, de inmunofluorescencia para células de SNpc con TH). Utilizando el test de Anova, se demostró una disminución en el número de giros en animales trasplantados (p=0,005), así como en el test neurológico (p=0,0004) y en el Test de barra transversal, que colocan a este grupo en una posición intermedia con respecto a LES y CON. Existe una posible recuperación de la vía nigroestriatal mediada por el trasplante de hMSC-GFP+.

ABSTRACT The effect of hMSCs-GFP+ transplantation was evaluated in an experimental model of Parkinson's disease (PD) in 27 Wistar rats, or in three experimental groups: control (CON n=7), injured (LES n = 10) and transplanted (LES+T n = 10). In order to evaluate the influence of the transplantation on the motor behavior, one month after the injury, rotation behavior induced by apomorphine, neurological test, transversal bar and SNpc cells positive to TH were developed. Using the Anova test, there was a decrease in the number of turns in transplanted animals (p=0,005) as well as in the neurological test (p=0,0004) and in the transverse bar that lead to this group in an intermediate position regarding LES and CON groups. There is a possible recovery of the transplantation-mediated nigroestriatal pathway of hMSC-GFP +.

Células madre mesenquimales y medicina regenerativa en la cirrosis hepática / Mesenchymal stem cells and regenerative medicine in liver cirrhosis

Las células madre mesenquimales (MSCs) son células multipotentes con capacidad de auto-renovación, presentes en diferentes tejidos del organismo. En los últimos años se ha avanzado significativamente en su estudio debido a su potencial terapéutico en medicina regenerativa. Las MSCs se caracterizan por migrar selectivamente a sitios de injuria y remodelación y por su capacidad para evadir al sistema inmunitario y colaborar en la reparación tisular mediante la secreción de factores tróficos. Numerosos estudios pre-clínicos y clínicos analizan su potencial efecto terapéutico en la cirrosis hepática con resultados alentadores. Diversas evidencias experimentales sugieren que este efecto podría ser superior si se utilizaran MSCs como vehículo de genes terapéuticos. En este trabajo se revisa el rol de las MSCs en medicina regenerativa y su empleo en estudios clínicos y pre-clínicos, con énfasis en su potencial como vehículo de genes terapéuticos.

Mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent cells with self-renewal capacity which are present in diverse tissues. Recently, significant progresses have been made in the field of MSCs because of its therapeutic potential in regenerative medicine. MSCs selectively migrate toward sites of damage and remodeling, and have the ability to evade the immune system and to promote tissue repair through the production of a number of growth factors and cytokines. Many pre-clinical and clinical studies have been carried out to study its therapeutic effect in liver cirrhosis with promising results. In addition, experimental studies showed that this therapeutic effect can be improved by engineering MSCs to produce therapeutic genes. In this work, the role of MSCs in regenerative medicine and its clinical and pre-clinical applications are reviewed, with an emphasis on its potential as vehicles for therapeutic genes.

Células tronco mesenquimales: definiciones, cultivo y aplicaciones potenciales / Mesenchymal stem cells: definitions, culture and potential applications

RESUMEN En los últimos años, las células troncales mesenquimales (Mesenchymal Stem Cells, MSC) han adquirido mucha importancia debido a su gran plasticidad y su capacidad de liberar factores paracrinos con capacidad de interactuar con diversos tipos celulares, tejidos y órganos. El uso de MSC en medicina regenerativa es importante debido a que, al no expresar las moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) clase II ni moléculas co-estimuladoras y tener baja expresión del MHC clase I, haría que no sean rechazadas por individuos de la misma especie, es posible utilizarlas no sólo de manera autóloga, sino también, eventualmente, alogénica. Sin embargo, es importante demostrar científicamente muchas de sus propiedades, entre ellas las inmunomoduladoras. Al tener varias fuentes de obtención, se debe estandarizar la que sea la mejor para garantizar la pureza y calidad de las MSC. Finalmente, es importante que cuando se trabaje con estas células se demuestre completamente las características del cultivo celular, la inmunotipificación y su capacidad de diferenciación. Se están ensayando muchas aplicaciones clínicas de las MSC. Dentro de ellas, su capacidad para mejorar la recuperación y potencial curación de úlceras crónicas como las diabéticas, ha atraído la atención por su potencial impacto terapéutico.

ABSTRACT In recent years, mesenchymal stem cells (MSC) have become very important due to their high plasticity and their ability to release paracrine factors able to interact with various cell types, tissues and organs. The use of MSC in regenerative medicine became of vital importance, since they do not express histocompatibility MHC molecules class II nor costimulant molecules, and low expression of MHC class I, will not be rejected by individuals of same species, they could be used in an autologous, and eventually, allogeneic manner. However, it is important to scientifically demonstrate many properties, including immunomodulatory ones. Having several sources of obtaining, it should be standardized the best one to ensure the purity and quality of these cells. Finally, it is important when working with these cells, that characteristics of cell culture, immunophenotyping and differentiation capacity are fully demonstrated. MSC have been applied in several clinical uses. Among them, their ability to improve, and even heal chronic ulcers, as diabetic, has attracted attention for its potential therapeutic impact.

Comparación de la viabilidad y crecimiento en cultivo de células madre adultas obtenidas de tejido adiposo pre y post congelamiento / Comparison of the viability and growth in stem cell culture obtained from adipose tissue (ADAS) pre and post freeze

Objetivo. Comparar viabilidad, crecimiento en cultivo, fenotipo y diferenciación a linaje osteogénico de ADAS (Adipose-Derived Adult Stem Cells) pre y post congelamiento. Método. Se obtuvieron muestras de TA de individuos sanos que fueron sometidos a liposucción, con posterior digestión enzimática con Colagenasa I. La fracción vascular estromal (FVE) obtenida fue dividida equitativamente en dos fracciones una de las cuales fue criopreservada y almacenada a -196°C y la otra cultivada hasta pase uno antes de ser criopreservada. Ambas fracciones fueron criopreservadas en cámara de congelamiento automatizada utilizando dos soluciones de congelamiento: (A) Dimetilsulfóxido (DMSO)/Dextrano40/albúmina sérica humana (HSA) y (B) DMSO/HESSICO/HSA, mantenidas 3 meses a -196°C y descongeladas con buffer fosfato salino (PBS)/HSA/HESSICO. Posterior a su descongelamiento fueron sometidas a cultivo, recuento, viabilidad celular, fenotipificación y potencial osteogénico. Resultados. Las células congeladas con la solución crioprotectora DMSO/Dextrano40/HSA y con un cultivo previo al congelamiento, presentaban porcentajes de viabilidad más altos y alcanzaban confluencia del 80% en cultivo en menos tiempo. Las muestras expandidas no presentaron diferencias en el fenotipo por citometría de flujo y mostraron diferenciación a linaje osteogénico.

Objective. Comparing viability, growth in culture, phenotype and osteogenic lineage differentiation of Adipose-Derived Adult Stem Cells (ADAS) pre and post freezing. Methods. Samples were obtained from adipose tissue of healthy individuals who underwent liposuction, to which underwent enzymatic digestion with collagenase I. The stromal vascular fraction (SVF) obtained was divided equally into two fractions one of which was cryopreserved and stored at -196 °C and another cultivated to passage 1 (P1) before being cryopreserved. Both fractions were cryopreserved by chamber automated freezing using two solutions: (A) DMSO/Dextran40/HSA and (B) DMSO/HESSICO/HSA kept 3 months at -196°C and thawed in PBS/HSA/HESSICO. After its thawing were also subjected to cultivation, count, cell viability, phenotyping and osteogenic potential. Results. Found that frozen cells with cryoprotectant solution DMSO/Dextran40/HSA and a pre-freezing culture, viability percentages exhibited higher and reached 80% confluence in less time. Expanded samples showed no differences in the phenotype by flow cytometry and shown to osteogenic lineage differentiation.

Propiedades inmunomoduladoras de las células madre mesenquimales / Inmunomodulatory properties of mesenchymal stem cells

Las estrategias de terapia celular se han utilizado con fines tan diversos como la regeneración de tejidos, la potenciación de la respuesta inmune antígeno específicas para la terapia antitumoral, la liberación de drogas en tejidos dañados y la restauración de la homeostasis en sitios con procesos inflamatorios crónicos. Dentro de las poblaciones celulares con mayor potencial para este tipo de alternativa terapéutica se incluyen las células madre mesenquimales (CMM), un grupo heterogéneo de células estromales multipotentes que se caracterizan por su baja inmunogenicidad y que ha demostrado una elevada versatilidad respecto a sus efectos inmunomoduladores. El presente trabajo recoge evidencias que se han acumulado en la última década que permiten valorar el potencial de las CMM para la terapia celular(AU)

Cellular therapy is a versatile therapeutic approach that has been assessed on tissue regeneration, on the enhancement of tumor specific immune response, on the delivery of drugs to damage tissues and on the restoring of tissue homeostasis at chronic inflamed sites. Among the cell populations used for cellular therapy, multipotent mesenchymal stem cells (MSC) appear as a heterogeneous group of cells with the highest potentiality based on its low immunogenicity and its ability to exert a plethora of immunomodulatory effects. This paper reviews the experimental evidences accumulated during the last decade in order to estimate the relevance of MSC for therapies based on cellular transference(AU)

Biocompatibilidad de células madres mesenquimales de tejido gingival humano en cultivoconun andamiaje de polímero sintético de ácido poliláctico (OPLA) / Biocompatibility of mesenchymal stem cells derived from human gingival tissue in culture with a scaffold of a synthetic polymer open porosity polylactic acid polymer (OPLA)

La ingeniería tisular se plantea como tratamiento ideal para la regeneración de tejidos con la utilización de andamiajes, células madres y factores de crecimiento. Las células madres de origen gingival plantean ventajas de obtención, mientras que el OPLA 3D permite cultivos de alta densidad celular. El objetivo de esta investigación fue evaluar la biocompatibilidad de células madres de origen gingival en OPLA. Las células se obtuvieron de tejido gingival y fueron caracterizadas fenotípica y funcionalmente. La biocompatibilidad se evaluó mediante la proliferación celular, prueba de viabilidad con azul tripán y diferenciación celular a linaje condrogénico y osteogénico. El recultivo del constructo se utilizó para evaluar la capacidad de transporte. Las células al interior del OPLA se visualizaron mediante cortes teñidos con H-E. Las células madres mesenquimales en OPLA proliferaron, 80% de confluencia a la cuarta semana. La viabilidad celular en OPLA fue de 83,32%. En el recultivo, las células comienzan a proliferar a la semana. El OPLA permite la diferenciación celular a linaje condrogénico y osteogénico. Se observan células al interior del OPLA, permite la proliferación, viabilidad y diferenciación celular. El OPLA podría ser utilizado como andamiaje celular para la ingeniería de tejidos.

Tissue engineering arises as the ideal treatment for tissue regeneration with the use of scaffolds, stem cells and growth factors. Stem cells derived from gingival tissue present benefits in its objection. 3D OPLA allow high cell density cultures. The objective of this study was to evaluate the biocompatibility of gingival stem cells in OPLA. Cells were obtained from gingival tissue and were characterized phenotypically and functionally. The biocompatibility was evaluated through cell proliferation, viability test with trypan blue and cell differentiation to chondrogenic and osteogenic lineage. Recultivation of the construct was used to evaluate transportability. Cells inside OPLA were visualized by stained sections with H&E. Mesenchymal stem cells proliferated in OPLA, 80% confluence at the fourth week. Cell viability in OPLA was 83.32%. In recultivation, cells start proliferating in a week. OPLA allows cell differentiation to chondrogenic and osteogenic lineage. Cells were observed within OPLA. In conclusion OPLA allows proliferation, viability and cell differentiation. OPLA could be used as scaffolds for cells in tissue engineering.

Aislamiento, caaacterización y potencial de difrenciación de células madre messenquimales caninas derivadas de tejido adiposo / Islation, characcterization and poential differentiation of caninne mesenchymal stem cells derived from adipose tissue

Se caracterizaron células obtenidas del tejido adiposo subcutáneo de caninos para demostrar su naturaleza de células madre mesenquimales (ad-MSCs). Las células se cultivaron y expandieron bajo condiciones in vitro. Se determinó la presencia de marcadores de superficie CD73, CD90 y CD105 por citometría de flujo y PCR en tiempo real, siendo idéntico el perfil de expresión obtenido al reportado en células madre mesenquimales humanas. Se demostró su potencial de diferenciación mediante análisis de expresión génica por PCR en tiempo real luego de inducirlas a procesos de diferenciación osteogénica y adipogénica. La capacidad de diferenciación osteogénica se evidenció a través de la expresión de genes de tejido óseo (colágeno tipo I y osteonectina) en una cinética de expresión concordante con los eventos moleculares y celulares del desarrollo óseo in vivo. El potencial adipogénico se evaluó por la formación de vacuolas lipídicas intracelulares y la expresión del gen de lipoprotein-lipasa, acorde con el proceso in vivo. Se concluye que las células mesenquimales obtenidas del tejido adiposo de caninos cumplen los criterios morfológicos, de expresión de marcadores de superficie específicos y de capacidad de diferenciación mesodérmica, confirmando su naturaleza de células madre mesenquimales. Los resultados del presente trabajo indicaron que las ad-MSCs de los caninos son un excelente modelo preclínico para el desarrollo de aplicaciones en medicina regenerativa, tanto en medicina veterinaria, como en medicina humana.

Cells obtained from the canine subcutaneous adipose tissue were characterized to demonstrate the nature of mesenchymal stem cells (adMSCs). The cells were cultured and expanded in vitro conditions. The presence of the surface markers CD73, CD90 and CD105 by flow cytometry and real time PCR was determined. The expression profile is identical to that reported in human mesenchymal stem cells. The differentiation potential was demonstrated by gene expression by real time PCR after induction osteogenic and adipogenic. Osteogenic differentiation was evidenced by the expression of genes of bone tissue (type I collagen and osteonectin) in expression kinetics consistent with the molecular and cellular events of bone development in vivo. In the adipogenic differentiation, were the formation of intracellular lipid vacuoles and expression of lipoprotein lipase gene (LPS), according to the in vivo process. We conclude that mesenchymal, cells derived from adipose tissue of dog, meet the morphological criteria, expression of specific surface markers and mesodermal differentiation capacity, confirming the nature of mesenchymal stem cells. The canine mesenchymal stem cells are an excellent preclinical model for developing applications in regenerative medicine that can be used both in veterinary and human medicine.

El tejido adiposo como fuente alternativa en la medicina regenerativa / Adipose tissue as an alternative source for regenerative medicine

El tejido adiposo constituye una fuente alternativa en la terapia celular debido a diferentes factores como su fácil extracción, su alto contenido de células madre mesenquimales y la capacidad de su expansión ex vivo que puede ser equivalente o hasta superior a las células obtenidas de la médula ósea en términos de su habilidad de diferenciación, potencial de angiogénesis y sus efectos inmunomoduladores en la inflamación. Estas células presentan el siguiente perfil de expresión: marcaje positivo para CD29, CD44, CD54, CD90, CD105 y HLA clase I y negativas para CD45, CD116, CD14, CD31 y HLA-II. En la actualidad existen evidencias que las células madre derivadas de tejido adiposo tienen el potencial de diferenciarse, además, a células de origen no mesodérmico como: neuronas, células pancreáticas, endocrinas, hepatocitos, cardiomiocitos y células epiteliales, entre otras. Debido a todos estos factores y a la ausencia de problemas éticos e inmunológicos, sugieren una nueva posibilidad en el tratamiento de muchas enfermedades comunes a la práctica médica cotidiana

Adipose tissue is an alternative source in cell therapy due to various factors such as its easy extraction, its high content of mesenchymal stem cells and their capacity of ex vivo expansion which can be equivalent or even superior to cells obtained from bone marrow in terms of its ability of differentiation potential of angiogenesis and its immunomodulatory effects in inflammation. These cells have the following expression profile: positive staining for CD29, CD44, CD54, CD90, CD105 and HLA-I; and negative for CD45, CD116, CD14, CD31 and HLA-II. At present, there is evidence that the stem cells derived from adipose tissue has have the potential to differentiate in addition to cells of mesodermal origin as neurons, pancreatic cells, endocrine, hepatocytes, cardiomyocytes and epithelial cells, among others. Because of All these factors and the absence of ethical and immunological problems suggest a new possibility in the treatment of many diseases common to everyday medical practice